| Načini analize bikarbonata | 1. Kontinuirani autoanalizatori
2. Enzimatska metoda
3. Manometrijski
4. pCO2 elektroda |
| 1. Kontinuirani autoanalizatori | Indirektno preko CO2, se dobiva HCO3 rezultat.
HCO3- se spaja sa H+ i nastaje H2CO3, koja se razlaže na CO2 i H2O.
CO2 difunduje kroz silikonske membrane na recipient pufera čija je vrijednost 9,2. Reakcija sa indikatorom fenolftaleinom i dolazi do redukcije boje. |
| 2. Enzimatska metoda | Alkalizacija uzorka prvi korak, pa sledi reakcija:
HCO3- + PEP -----fosfoenolpiruvat karboksilaza ----> OO (nascentni kisik) + Pi (fosfat anorganski)
OO + NADH2 ----malat DH---> malat + NAD+ 340 nm UV opticki test |
| 4. pCO2 elektroda - osnov | pCO2 elektronde su specijalizirana forma pH elektroda, koje sadrže CO2 permeabilnu membranu koja pokriva površinu staklene membrane.
Bikarbonatni pufer međusobno odvaja membrane
CO2 prolazi silikonsku membranu, reaguje sa vodom i nastaje H2CO3, koji se razlaže na H+ i HCO3-, pa dolazi do promene pH pufera u kom se nalazi mjerna elektroda (promena pH vrednosti pufera ce biti DIREKTNO proporcionalna konc. CO2)
Preko HCO3- odredjujemo konc. CO2. |
| Reakcija pCO2 elektroda | CO2 + H2O (karboanhidraza) ----> H+ + HCO3- |
| O cemu treba voditi racuna? Magnezij SPEKTROFOTOMETRIJSKE METODE | 1. Hemoliza (čime se povećava c. Ca i Mg)
2. Ne koristiti nikad oksalat ili EDTA kao antikoagulanse (vežu Mg)
3. Urin kao uzorak je potrebno zakiseliti na pH=1 i zagrijati na 60 stepeni |
| Magnezij metode nabrojati | 1. NASTANAK FLUOROSCENTNIH KOMPLEKSA , TITRACIJA (KOMPLEKSOMETRIJA)
2. PLAMENA EMISIONA SPEKTROMETRIJA (370,383 nm)
3. AAS—abs = 285,2 nm referentna metoda
4. NEUTRONSKA AKTIVACIJA, izotopska dilucija, 27 Mg definitivna
5. Spektrofotometrija |
| Magnezij SPEKTROFOTOMETRIJSKE METODE - danas se koristi.... | - Mg2+ i Kalmagit- ljubicasti kompleks 530-550 nm |
| Magnezij SPEKTROFOTOMETRIJSKE METODE - problemi i kako ih se riješiti | Lipemija i Ca2+ interferencije
Rijesiti se interferenci Ca sa N,N, N, N' tetracetat
Problem- lipemija se rješava:
- Metil timol plavo (Rijetko jer i kalcij reaguje)
- Magon ksilidil plavo
- Formazan kompleks
- Titanovo zutilo koloid |
| 1. NASTANAK FLUOROSCENTNIH KOMPLEKSA , TITRACIJA - reakcija | Mg + kalcein ----> Mg kalcein (ekscitacija na 420, zeleno)
Mg + o-o' dihidroksiazobenzen----> fluoroscentni kompleks
Eks na 420 nm, Em na 530 nm (emituje fluerscentni kompleks) |
