ELEKTROFORESIS, WESTERN BLOTTING, & HIBRIDISASI
🇮🇩
In Indonesian
In Indonesian
Practice Known Questions
Stay up to date with your due questions
Complete 5 questions to enable practice
Exams
Exam: Test your skills
Test your skills in exam mode
Learn New Questions
Manual Mode [BETA]
Select your own question and answer types
Specific modes
Learn with flashcards
Listening & SpellingSpelling: Type what you hear
multiple choiceMultiple choice mode
SpeakingAnswer with voice
Speaking & ListeningPractice pronunciation
TypingTyping only mode
ELEKTROFORESIS, WESTERN BLOTTING, & HIBRIDISASI - Leaderboard
ELEKTROFORESIS, WESTERN BLOTTING, & HIBRIDISASI - Details
Levels:
Questions:
56 questions
🇮🇩 | 🇮🇩 |
Ukuran protein paling kecil adalah? | +- 50 residu |
Apa saja yg perlu dierhatikan untuk menentukan ukuran protein? | Berat molekul dan jumlah residu N-terminal |
Apa yg harus dilakukan untuk mengukur BM protein? | Polipeptida harus dalam keadaan terurai |
Untuk mengurai protein dibutuhkan apa saja? | Detergent dan denaturant |
Teknik untuk menentukan ukuran protein adalah? | Filtrasi gel analisis sedimentasi electrospray ionization mass spectrometry |
Filtrasi gel menggunakan bahan apa? | Detergent SDS (sodium dodecyl sulfate) |
Elektroforesis adalah | Suatu pergerakan partikel atau koloid yang bermuatan listrik melalui suatu gel yang dipengaruhi oleh medan listrik pemisahan protein dari suatu campuran dengan menggunakan medan listrik |
Kegunaan eletroforesis adalah | Menentukan titik isoelektrik menentukan ukuran protein memisah, mengidentifikasi, pemurnian protein dan fragmen DNA |
Struktur yang dapat dipisahkan oleh SDS adalah? | Struktur tersier protein menjadi berbentk linier |
Gel elektroforesis adalah | Gel yg berguna sbg saringan agar molekul sesuai dengan uukuran dan bentuknya |
Cara kerja SDS adalah | SDS akan melapisi protein dengan muatan negatif yg seragam, yang menutupi muatan intrinsik pada kelompok R. SDS berikatan scr merata dengan protein linier (sekitar 1,4g SDS / 1g protein), artinya bahwa muatan protein sekarang kira-kira sebanding dengan berat molekulnya. SDS juga terdapat pada gel untuk menjaga linearitas protein dan membungkus nya dan tetap dlm muatan negatif selama running |
Bagaimana karakteristik protein berlapis SDS? | Molekul linier dengan panjang gelombang dan lebar 18 angstroms yg proporsional sebanding dengan berat molekulnya |
Radius molekuler dapat ditentukan oleh? | Berat molekul protein |
Matriks gel yang digunakan untuk SDS page adalah? dan kenapa? | Poliakrilamida, krn tidak bermuatan dan dapat dgn mudah dibuat pada berbagai konsentrasi untuk menhasilkan ukuran pori yang berbeda |
Protein yang terbungkus SDS cenderung bergerak menuju mana? | Anoda positif dgn gradasi yg berbeda tergantung BM |
Bahan elektroforesis apa saja? | Gel dengan detergen SDS akrilamid |
SDS fungsinya ? | Membungkkus atau menyelimuti protein sehingga protein bermuatan negatif sehingga sampel akan berjalan pada gel dr atas ke bawah (tergantung ukuran molekul) |
Tahapan dalam elektroforesis tdd? dan jelaskan | Tahap persiapan : - P’buat’n gel pd glass slab & p’cetakan tempat sampel dg comb - m’masuk’k running buffer pd bak upper & lower) - p’siap’n sampel (denaturasi)+RSB(Reducing Sample Buffer) - m’masuk’k sampel pd gigi yg d’cetak dg comb - m’masuk’k marker Tahap kerja : - d’hubung’k dg alir’n listrik dg voltase & ampere ttt - sampel yg d’beri p’nanda RSB b’warna biru akan b’gerak dr atas ke bwh hingga m’capai bak yg b’isi running buffer - Aliran listrik d’mati’k - gel d’lepas dr glass slab |
Untuk pendeteksian BM protein apakah perlu dilakukan pewarnaan? pewarnaannya menggunakan apa? | Tidak, commasie blue dan perak nitrat |
Western Blotting adalah | Teknik transfer protein dari gel elektrofresis ke matriks membran |
Fungsi western blotting adalah | Identifikasi dan klasifikasi protein yg spesifik dengan antibodinya |
Matriks membran yg digunakan adalah? | Nitroselulosa, PVDF (polyvinil Diode Fluoride), nylon |
Di dalam label untuk WB terdapat? | Biotin, probe fluoresen, enzim konjugat |
Probe fluoresen yg digunakan adalah? | Fluorescein atau rhodamin |
Enzim konjugat untuk WB adalah? | Horseradish peroxidase atau alkaline phosphatase |
Jenis substrat WB adalah? | Chromogenic dan fluorogenic |
Fluorogenic dibaca dengan menggunakan? | Fluorometri |
Pewarnaan dalam praktikum menggunakan | Western blue dan rhodamin |
Metode pendeteksian dari WB adalah? | Direct dan indirect detection method |
Fungsi hibridisasi adalah | Mencari informasi letak fragmen DNA dlm genom analisis transkripsi & regulasi Deteksi penyakit genetik sidik jari DNA |
Dasar metode hibridisasi adalah? | Kemampuan asam nukleat untuk menjadi 2 rantai dengan ikatan spesifik/konsisten/hybrid (AT/GC) |
Prinsip hibridisasi adalah | Ikatan asam nukleat pelacak (sudah diketahui) dgn asam nukleat target |
Macam hibridisasi ada apa saja? | 1. hibridisasi southern 2. hibridisasi nothern 3. hibridisasi dot 4. hibridisasi in situ |
Menentukan lokasi fraksi DNA dalam genom menggunakan hibridisasi apa? | Hibridisasi southern |
Hibridisasi southern menggunakan enzim apa untuk memotong DNA genom? | Enzim restriksi endonuklease |
Fragmen DNA dipisahkan menurut apa dang dengan cara apa? | Berdasarkan ukuran dengan cara elektroforesis gel agarosa |
DNA yg telah menempel pada membran nilon lalu diapakan? | Dihibridisasi dengan pelacak DNA berlabel radioaktif dan autoradiografi |
Target hibridisasi nothern, hibridisasi dot, hibridisasi in situ adalah? | N= fragmen RNA yg telah dipisahkan dgn elektroforesis D= asam nukelat (DNA/RNA @ membran) I= DNA/RNA @preparat sitologis |
Hibridisasi nothern, dot, insitu menggunakan pelacak apa | N= pelacak DNA berlabel D= pelacak DNA/RNA berlabel I= pelacak DNA/RNA berlabel |
Proses kerja WB adalah? | - Blotter td dr 2 sisi, d’antara kedua sisi dalam d’letak’k : bantalan (spon) – bbrp lb.kertas whatman yg d’basah’i buffer blotting – membran nitroselulose – gel protein yg tlh d’running – bbrp lb. kertas whatman basah – bantalan. - Alat electro blotter d’hubungkan dg listrik, proses b’jalan bbrp jam. - Stlh proses b’akhir membran yg tlh b’isi pita-pita protein dr gel d’laku’k blocking - Stlh blocking, d’inkubasi’k dg antibodi primer - d’cuci & d’inkubasi dg antibodi sekunder yg tlh d’label dg enzim - d’tambah’k substrat utk p’baca’n hasil |
Deteksi hibridisasi dengan cara? | Film X-ray (untuk label radioaktif) reaksi warna (untuk non radioaktif) |
Pelacak label nonradioaktif adalah | Kolorimetri, fluorescent, chemiluminens, spektrofotometer, fluorometer, luminometer |
Proses hibridisasi dipengaruhi oleh | Tingkat komplementasi tinggi, dupleks stabil, suhu tertentu |
Fungsi washing adalah | Utk m’hilang’k k’lebih’n pelacak yg tdk m’tempel pd DNA target yg spesifik |
Bagaimana cara memindahkan DNA untai tunggal pd membran? | Dipanaskan dengan suhu 80 derajat atau dengan sinau ultraviolet |
Stabilisasi dupleks tergantung pada | Jumlah basa komlemen jenis bbasa komplemen kadar garam suhu , pelacak dgn ukuran pendek, titik leleh rendah |
Hibridisasi insitu untuk mendeteksi apa? | DNA/RNA spesifik, jaringan, virus, koloni mikroorganisme |
Untuk hibridisasi insitu, DNA sel didenaturasi mengunakan apa? dan pelabelan menggunakan apa? | Denaturasi = formamide pelabelan menggunakan radioaktif/biotin DNA atau RNA dengan komplementer mRNA pada jaringan |